Antibiyogram Duyarlılık (Disk Difüzyon Yöntemi)

🔬 Disk Difüzyon Yöntemi (Kirby-Bauer Yöntemi)

📌 Amaç:

Bir bakteriyel patojenin, çeşitli antibiyotiklere karşı duyarlılığını belirleyerek tedaviye yön vermek.

🧪 Gerekli Malzemeler:

• Saf bakteri kültürü

• Mueller-Hinton agar (standart besiyeri)

• Antibiyotik diskleri (standart dozda)

• Steril pamuklu çubuk (swab)

• İnkübatör (35-37°C)

• Petri kutuları

• Steril çalışmaya uygun laboratuvar koşulları

🔁 Yöntem Adımları:

1. Bakteri Süspansiyonunun Hazırlanması:

   • Saf kültürden alınan bakteriler, %0.5 McFarland standardına uygun olacak şekilde steril fizyolojik tuzlu suda süspanse edilir.

   • Bu yoğunluk yaklaşık olarak 1.5 × 10⁸ CFU/mL'dir.

2. Besiyerine Ekimi:

   • Mueller-Hinton agar yüzeyine steril pamuklu çubukla bakteriyel süspansiyon eşit şekilde yayılır (çimlenme ekimi yapılır).

3. Antibiyotik Disklerinin Yerleştirilmesi:

   • Bakteri sürüldükten sonra, çeşitli antibiyotikleri içeren kağıt diskler agar yüzeyine yerleştirilir.

   • Diskler arası yeterli mesafe bırakılır.

4. İnkübasyon:

   • Petri kapları 35-37°C’de, 16-18 saat boyunca inkübe edilir.

5. Sonuçların Değerlendirilmesi:

   • Antibiyotik disklerinin etrafındaki bakterisiz alanlar (inhibisyon zonları) ölçülür (mm cinsinden).

   • CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) veya EUCAST gibi standartlara göre zon çaplarına bakılarak:

     • Duyarlı (S - Susceptible)

     • Orta Duyarlı (I - Intermediate)

     • Dirençli (R - Resistant) olarak yorumlanır.

📊 Avantajları:

• Ucuz ve kolay uygulanabilir

• Birden fazla antibiyotik aynı anda test edilebilir

⚠️ Dikkat Edilmesi Gerekenler:

• McFarland standardına uygunluk

• Doğru inkübasyon süresi ve sıcaklığı

• Kullanılan agar ve disklerin standarda uygun olması